ATP荧光檢測儀檢測原理 常用ATP荧光檢測儀有3M LM1荧光檢測儀 海淨納PLUS V2荧光檢測儀 龟甲萬PD-30荧光檢測儀 紐勤ATP荧光檢測儀9902 海淨納ensure大腸杆菌荧光檢測儀 國產ATP荧光檢測儀等都是采用以下原理
能催化荧光素氧化並產生生物光的一類酶被稱爲荧光素酶（Luciferase）。
荧光素酶的種類很多，其中包括：蟲荧光素酶，細菌荧光素酶，其他荧光素酶等，
現在研究和應用多的是萤火蟲荧光素酶，比如北美萤火蟲荧光素酶、日本萤火
蟲荧光素酶、歐洲萤火蟲荧光素酶、北京萤火蟲荧光素酶等。目前，萤火蟲荧光
素酶的發光體系的研究主要是來自北美萤火蟲，而國內生產的荧光素酶大部分也
是通過克隆北美荧光素酶基因方法獲取的。雖然各種荧光素酶結構不同，但其差
別不大，具有同源性。其中以北美萤火蟲荧光素酶爲例對其基本特征進行描述：
北美萤火蟲荧光素酶是由單一多肽鏈組成的，含 551 個氨基酸，不含輔助因子
並且大部分氨基酸是非極性氨基酸，分子量約 62kD，等電點是 6.24，在空間結
構中含有兩對二硫鍵，並且有兩個 Trp，它的大吸收值爲 562nm。具體蛋白
結構見下圖：
3萤火蟲荧光素酶催化發光是在 ATP、荧光素和 Mg2+存在下發出黃綠色荧
光的。一般的多數科學家認爲荧光素酶作爲催化劑催化的是 D-荧光素，D-荧光
素氧化發光而且在一定條件下荧光的發射強度直接與 ATP 的濃度呈正相關。其
化學反應方程式爲：
Luciferin+ATP+O2＝Oxyluciferin+AMP+PPi+CO2+Light
反應過程先是荧光素酶與荧光素結合，然後借高能化合物 ATP 提供的能量，
形成具有高活性的複合物，此複合物與氧氣反應形成過氧化物後，裂解而形成激
發態物質。荧光素的（LH2）活性中心首先與荧光素酶結合形成 E-LH2。然後再
與 ATP 作用產生焦磷酸，後發出荧光：
形成的過氧化物可能是二氧丁環酮，其裂解反應生成激發態產物氧化荧光
素，激發態的氧化荧光素發射光子回到基態。這一反應簡化爲：
42
E-LH +ATP-Mg +O P(L=O)+E-AMP+CO +PPi+h 2 2 2 υ
具體的化學反應過程如下
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